SNaPshot法SNP分型技术服务

★试验原理

该技术由美国应用生物公司（ABI）开发，是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中，引物延伸一个碱基即终止，经ABI测序仪检测后，根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得，通常用于10-30个SNP位点分析。

★试验流程

●DNA 提取和质检；

●引物设计与合成；

●扩增反应；

●延伸反应；

●测序仪检测；

●数据分析。

★优点

1、通量高，一次反应可扩增多10-15个位点；

2、数据完整性高，相对于MassArray高通量分析的时候经常发生个别样本失败或者个别位点丢失的情况，MassArra方法丢失的数据进行补充造价很高，一般不会补，而该方法可以以较成本补充实验；

3、适应性强，实验结果可靠，该方法是ABI公司在10多年前开发成功的，历经了很多验证，发表了大量文章。

★送样要求：

1、组织样本：-20℃或-80℃温冰箱中保存，液氮或者干冰运输；市内或短途运输可冰袋运输。若提供的材料为新鲜组织、血液细胞等生物材料，请提供足够提取2ug以上基因DNA的材料量。

2、DNA样本：体积≥50ul，浓度≥50ng/ul，DNA总量≥2ug，纯度 OD260/280 在1.7～1.9之间，不含PCR抑制剂，须注明浓度。样品须温冰袋运输。

3、血液样本：要求保存于抗凝管中或冻存管中，体积大于2ml，请用干冰运送，DNA不降解。

4、样品为石蜡包埋组织切片的，要求提供10张组织切片光片（面积>10mm×10mm,厚度约5-10um）。